VRDL

PRÁCTICA 11- 

VRDL Y THPA

Objetivo

Determinación sérica de anticuerpos dirigidos contra la bacteria Treponema pallidum, causante de la sífilis o contra treponemas patógenos.

Fundamento

La VRDL y THPA son pruebas serológicas que se utilizan para detectar la sífilis, una enfermedad infecciosa de transmisión sexual, contagiosa muy expandida, producida por la bacteria Treponema pallidum Un rápido diagnóstico permitirá tratar la enfermedad en una etapa inicial antes de que los síntomas se agraven.

Las pruebas de detección para sífilis son una parte rutinaria del cuidado prenatal durante el embarazo, ya que la embarazada tiene sífilis, puede transmitirle la infección a su bebé en gestación.

La VRDL (Venereal Disease Research Laboratory)  es una prueba no treponémica que detecta los  anticuerpos que no van dirigidos específicamente contra la bacteria Treponema pallidum, sino contra todos los treponemas patógenos. Por lo tanto, el organismo produce estos anticuerpos ante una sífilis pero también en otras situaciones. Nosotros hemos realizado la VRDL.

La HTPA (Treponema Pallidum Haemaglutination Assay) es una prueba prueba treponémica que detecta específicamente anticuerpos dirigidos contra Treponema pallidum, identifica el antígeno cardiolipídico.

La determinación plasmática de dicho anticuerpos se realiza ensayando la muestra problema con un reactivo que contiene los antígenos. La presencia o ausencia de una floculación visible al microscopio es indicativa de la presencia o ausencia de dichos anticuerpos en la muestra problema.

Los resultados de las pruebas TPHA y VDRL pueden variar según las técnicas utilizadas por los laboratorios, por tanto, los resultados no constituyen un diagnóstico. Es necesario consultar a un médico con el fin de prever exámenes complementarios o un eventual tratamiento.

Materiales

-          Kits comerciales para la determinación de VDRL y TPHA. (que incluyen control positivo, control negativo y reactivo)

-           Muestra de suero problema.

-          Placas multipocillos o tarjetas de diluciones.

-          Micropipetas variables y puntas de micropipeta.

-          Palillo.

-          Rotatorio

-          Microscopio

Técnica : VRDL

1. Equilibrar los reactivos y muestras a temperatura ambiente.

2 Depositar una gota del control positivo en el primer pocillo (aproximadamente 50 microlitros)

2. Depositar una gota del control negativo en el segundo pocillo (aproximadamente 50 microlitros).

3. Depositar una gota del suero problema en el tercer pocillo (aproximadamente 50 microlitros).

4. Depositar una gota de reactivo en cada pocillo (aproximadamente 50 microlitros).

5. Mezclar las gotas con un palillo extendiendo la disolución por todo el pocillo. Utilizar un palillo para cada pocillo.

6. Agitar manualmente.

7. Observación.

Resultado

La lectura se puede hacer macroscópica y microscópicamente.

                             

Un resultado positivo se observaría con la presencia de aglutinación, lo que significaría la presencia en el suero de anticuerpos contra la bacteria. Por el contrario, un resultado negativo, sin aglutinar, significaría que la muestra no contiene los anticuerpos contra la bacteria.

Resultado positivo a la izquierda y negativo a la derecha.

En la lectura microscópica, La presencia de una floculación es indicativa de la presencia de dichos anticuerpos en la muestra problema. Y la ausencia de la floculación indicaría la ausencia de los anticuerpos.

 Resultado negativo

 Resultado positivo