PRÁCTICA 10-
ROSA DE BENGALA
ROSA DE BENGALA
Objetivo
Determinación cualitativa de anticuerpos anti- brucella.
Fundamento
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| BACTERIA DE BRUCELLA Causante de la Brucelosis |
La brucelosis, también llamada fiebre de Malta, fiebre mediterránea, fiebre ondulante, o enfermedad de Bang, es una enfermedad zoonótica infecciosa de distribución mundial, producida por bacterias del género Brucella.
El diagnóstico de la brucelosis puede establecerse bien sea por el aislamiento del microorganismo en sangre en heces, o por la demostración de la presencia de anticuerpos específicos en el suero del paciente.
La prueba Rosa de Bengala es una técnica rápida de aglutinación para la detección cualitativa y semicuantitativa de anticuerpos anti-Brucella en sueros de animales y humanos.
La determinación se efectúa ensayando la suspensión tamponada (pH 3,6) de Brucella coloreada con Rosa de Bengala frente a los sueros problema. El reactivo, es capaz de reaccionar con anticuerpos IgG o IgM, por lo que es muy útil para el diagnóstico de individuos en fase crónica de la enfermedad, los cuales presentan un nivel elevado de anticuerpos IgG difícilmente detectables por el método tradicional de aglutinación en tubo.
La presencia de Brucella se observa con aglutinación (control positivo) y la ausencia de la muestra se identifica cuando no existe aglutinación (control negativo). La muestra problema no muestra aglutinación, por lo que es negativa, y por tanto no contiene los anticuerpos específicos para Brucella.
Materiales
- Tarjetas de diluciones
- Reactivos para rosa de bengala (contro positivo, control negativo y reactivos)
- Palillo para mezclar
- Micropipeta de 50 μL
- EPI: guantes, bata…
Técnica
1. Atemperar los reactivos y las muestras a temperatura ambiente. La sensibilidad del ensayo disminuye a temperaturas bajas.
2. Depositar 50 μL de control positivo en el primer pocillo, 50 μL de control negativo en el segundo pocillo y 50 μL de el suero problema en el tercer pocillo.
3. Homogeneizar suavemente el reactivo de rosa de bengala antes de usar. Depositar una gota en cada pocillo junto a cada una de las gotas anteriores.
4. Mezclar las gotas con un palillo, procurando extender la mezcla por toda la superficie interior del círculo. Emplear distintos palillos para cada muestra.
5. Mover la tarjeta lentamente y observar el resultado.
Resultado
Un resultado positivo se observaría como en el control positivo con la presencia de aglutinación, lo que significaría la presencia en el suero de los anticuerpos anti-Brucella. Por el contrario, un resultado negativo se apreciaría como en el control negativo, sin aglutinar, lo que significaría que la muestra no contiene los anticuerpos contra la enfermedad.
Como podemos ver en nuestra práctica la gota de la muestra no aglutina al igual que el control negativo. Por lo tanto, la muestra no tiene y la persona de la muestra no tiene los anticuerpos anti-Brucella y no hay indicios de tener brucelosis.
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