PRÁCTICA 11-
VRDL Y THPA
Objetivo
Determinación sérica de anticuerpos dirigidos contra la bacteria Treponema pallidum, causante de la
sífilis o contra treponemas patógenos.
Fundamento
La VRDL y THPA son pruebas serológicas que se
utilizan para detectar la sífilis, una enfermedad infecciosa de transmisión
sexual, contagiosa muy expandida, producida por la bacteria Treponema
pallidum Un rápido diagnóstico permitirá tratar la enfermedad en
una etapa inicial antes de que los síntomas se agraven.
Las
pruebas de detección para sífilis son una parte rutinaria del cuidado prenatal
durante el embarazo, ya que la embarazada tiene sífilis, puede transmitirle la infección a su bebé en
gestación.
La VRDL (Venereal Disease Research
Laboratory) es una prueba no treponémica que detecta
los anticuerpos que no van dirigidos
específicamente contra la bacteria Treponema pallidum, sino contra
todos los treponemas patógenos. Por lo tanto, el organismo produce estos anticuerpos ante una
sífilis pero también en otras situaciones. Nosotros hemos realizado la VRDL.
La HTPA (Treponema Pallidum Haemaglutination
Assay) es una prueba prueba treponémica
que detecta específicamente anticuerpos dirigidos contra Treponema pallidum, identifica
el antígeno cardiolipídico.
La
determinación plasmática de dicho anticuerpos se realiza ensayando la muestra
problema con un reactivo que contiene los antígenos. La presencia o ausencia de
una floculación visible al microscopio es indicativa de la presencia o ausencia
de dichos anticuerpos en la muestra problema.
Los resultados de las pruebas TPHA y VDRL pueden
variar según las técnicas utilizadas por los laboratorios, por tanto, los
resultados no constituyen un diagnóstico. Es necesario consultar a un médico
con el fin de prever exámenes complementarios o un eventual tratamiento.
Materiales
-
Kits comerciales para la determinación de VDRL y TPHA.
(que incluyen control positivo, control negativo y reactivo)
-
Muestra de suero problema.
-
Placas multipocillos o tarjetas de diluciones.
-
Micropipetas variables y puntas de micropipeta.
-
Palillo.
-
Rotatorio
-
Microscopio
Técnica : VRDL
1.
Equilibrar los reactivos y muestras a temperatura ambiente.
2 Depositar una gota
del control positivo en el primer pocillo (aproximadamente 50 microlitros)
2. Depositar una gota del
control negativo en el segundo pocillo (aproximadamente 50 microlitros).
3. Depositar una gota del
suero problema en el tercer pocillo (aproximadamente 50 microlitros).
4. Depositar una gota de reactivo
en cada pocillo (aproximadamente 50 microlitros).
5. Mezclar las gotas con un
palillo extendiendo la disolución por todo el pocillo. Utilizar un palillo para
cada pocillo.
6. Agitar manualmente.
7. Observación.
Resultado
La lectura se puede hacer
macroscópica y microscópicamente.
Un resultado positivo se
observaría con la presencia de aglutinación, lo que significaría la presencia
en el suero de anticuerpos contra la bacteria. Por el contrario, un resultado
negativo, sin aglutinar, significaría que la muestra no contiene los
anticuerpos contra la bacteria.
Resultado positivo a la
izquierda y negativo a la derecha.
En la lectura microscópica, La presencia de una floculación es indicativa de la presencia
de dichos anticuerpos en la muestra problema. Y la ausencia de la floculación
indicaría la ausencia de los anticuerpos.
Resultado
negativo
Resultado positivo
